大肠杆菌(E.coli)表达系统服务
服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
原核表达系统是通过原核生物来获得外源蛋白的体系。原核表达是目前常用的重组蛋白表达方式之一,操作相对简便,要求较低。相对哺乳动物表达系统更加经济节约。
服务优势:
1、美仑生物拥有丰富的大肠杆菌可溶性蛋白表达、纯化及蛋白变复性经验。
2、我公司拥有多种E. coli细胞株和表达载体,满足特定蛋白质胞内表达及周质空间分泌表达需求。也可利用SUMO、GST、Trx及NusA等促融标签解决蛋白自身疏水性造成不可溶表达问题。提供从密码子优化到重组蛋白表达、纯化的一站式服务以及标签去除、内毒素去除等附加服务,以满足不同的定制需求。
3、针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。
4、我们会通过评估确定复性条件,进行温和的包涵体变复性。
5、我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。对于客户要求切除标签的情况,我们可以做到切标签不留残基。
6、我们具有特色的低温诱导表达体系,提高了蛋白可溶表达几率,增加了表达成功和蛋白产物的活性概率。可为客户提供优质的原核蛋白表达服务。
7、可进行大规模生产。
8、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。
9、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。
10、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。
服务内容:
主要流程 |
时间 |
内容 |
交付内容 |
基因合成及密码子优化 |
1-2周 |
客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。 |
|
载体构建 |
1-2周 |
1.克隆至合适的表达载体(可选择的表达载体以pET和pGEX系列为主) |
测序报告(若客户要求) |
表达鉴定及可溶性分析 |
1-2周 |
1.10mL培养 |
表达评估报告 |
放大表达和1-2步纯化 |
1-2周 |
1.蛋白纯化 (可溶表达) |
1.0.5-1mg纯化蛋白样品 |
大量表达及纯化(可选) |
2-8周 |
1.100mg或更多蛋白 |
1.纯化蛋白 |
附加项订购信息 |
时间 |
内容 |
交付内容 |
蛋白去内毒素 |
1-2周 |
去除蛋白内毒素 |
质量检测报告(CoA) |