大肠杆菌(E.coli)表达系统服务

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服务介绍:
重组蛋白表达技术可用于多种下游应用,包括基因调控分析、蛋白结构及功能分析、蛋白质间相互作用分析等。我们可提供基于原核、酵母、昆虫杆状病毒、哺乳动物细胞等多种蛋白表达系统的蛋白定制服务。
原核表达系统是通过原核生物来获得外源蛋白的体系。原核表达是目前常用的重组蛋白表达方式之一,操作相对简便,要求较低。相对哺乳动物表达系统更加经济节约。
服务优势:

1、美仑生物拥有丰富的大肠杆菌可溶性蛋白表达、纯化及蛋白变复性经验。

2、我公司拥有多种E. coli细胞株和表达载体,满足特定蛋白质胞内表达及周质空间分泌表达需求。也可利用SUMO、GST、Trx及NusA等促融标签解决蛋白自身疏水性造成不可溶表达问题。提供从密码子优化到重组蛋白表达、纯化的一站式服务以及标签去除、内毒素去除等附加服务,以满足不同的定制需求。

3、针对于有些外源基因在大肠杆菌中重组表达会形成膜包裹的高密度、不溶性蛋白质的包涵体的情况,我们会进行表达系统优化,尽量降低形成包涵体的几率。

4、我们会通过评估确定复性条件,进行温和的包涵体变复性。

5、我们提供的复性蛋白纯度在95%以上。对于客户要求切除标签的情况,我们可以做到切标签不留残基。

6、我们具有特色的低温诱导表达体系,提高了蛋白可溶表达几率,增加了表达成功和蛋白产物的活性概率。可为客户提供优质的原核蛋白表达服务。

7、可进行大规模生产。

8、具有完备的检测平台,如Elisa(酶联免疫吸附)、SDS-PAGE蛋白凝胶电泳、Western Blot(蛋白质免疫印迹)等检测平台,可对蛋白的浓度、纯度、活性等多项性能进行评估。

9、我们实行专人专项管理制度,即在整个项目期间,每个不同的实验阶段,都有相关人员与客户进行对接,始终保持与客户间的沟通,保证项目进展的透明化。

10、通过分步报价、按节点收费的方式,全面降低客户的风险,极大程度上节约了客户的成本。

服务内容:

主要流程

时间

内容

交付内容

基因合成及密码子优化

1-2周

客户提供目的蛋白的序列信息或质粒。

 

载体构建

1-2周

1.克隆至合适的表达载体(可选择的表达载体以pET和pGEX系列为主)
2.质粒测序
3.质粒制备

测序报告(若客户要求)

表达鉴定及可溶性分析

1-2周

1.10mL培养
2.3个表达条件尝试
3.表达菌株的选择
4.蛋白表达评估 (SDS-PAGE)

表达评估报告

放大表达和1-2步纯化

1-2周

1.蛋白纯化 (可溶表达)
2.蛋白变性复性纯化 (包涵体)
3.QC分析 (SDS-PAGE,UV等)

1.0.5-1mg纯化蛋白样品
(如蛋白表达可行)
2.质量检验报告 (CoA)

大量表达及纯化(可选)

2-8周

1.100mg或更多蛋白
2.QC检测

1.纯化蛋白
2.质量检验报告 (CoA)

附加项订购信息

时间

内容

交付内容

蛋白去内毒素

1-2周

去除蛋白内毒素

质量检测报告(CoA)

2022年3月30日 11:36
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